隨著輔助生殖技術(shù)的不斷發(fā)展,胚胎冷凍技術(shù)得到越來越廣泛的應(yīng)用,使得更多無法移植新鮮胚胎的不孕夫婦日后成功受孕。那么,我們所說的凍胚和是一回事嗎?

首先,我們來說說凍冷技術(shù)的發(fā)展。
為了提升卵子、胚胎解凍的存活率,冷凍技術(shù)已由過去的慢速冷凍(slow freezing)演進到現(xiàn)在的玻璃化冷凍(vitrification)。
慢速冷凍
利用低濃度的冷凍保護劑處理胚胎,逐步降低溫度后,再將胚胎保存在零下196℃的液態(tài)氮中。這種冷凍方式,細胞內(nèi)的水會形成結(jié)晶,并損傷細胞內(nèi)的細胞器,而體積增大甚至可能直接把細胞膜脹破,直接宣告生殖細胞死亡。
玻璃化冷凍
玻璃化冷凍法的基本原理是將高濃度的冷凍保護劑在超低溫環(huán)境下凝固,形成不規(guī)則的玻璃化樣固體,保存了液態(tài)時正常分子和離子分布,因而在細胞內(nèi)發(fā)生玻璃化時能起到保護作用。所保存細胞在冷凍保護液中脫水到一定程度后,則引起內(nèi)源性胞質(zhì)大分子如蛋白質(zhì)及滲透到胞內(nèi)的冷凍保護劑濃縮,從而使細胞在劇烈的快速降溫中得到保護。
玻璃化冷凍技術(shù)的特色就是使細胞本身及冷凍溶液在冷凍時,呈現(xiàn)黏稠而不產(chǎn)生結(jié)晶的玻璃化狀態(tài),利用這種不結(jié)冰的原理以改善慢速冷凍之缺點。
玻璃化冷凍過程中會受到諸多因素影響:冷凍保護劑的類型和濃度、玻璃化冷凍液的作用溫度、細胞與投入液氮前與保護劑的接觸時間、冷凍過程中的承載工具、細胞的發(fā)育階段和質(zhì)量等。
第二,我們要明確和凍胚的定義。
卵子是人類較大的細胞,含有大量的水分,它在失水后會變形,解凍后又由皺縮的形態(tài)恢復(fù)飽滿。卵子冷凍不同于我們平時用冰箱冷凍食品,我們用的是液氮保存卵子,保存的溫度為零下196攝氏度。手術(shù)取出的卵子異常嬌弱且壽命有限,更別說如此快速的降溫,因此,卵子冷凍難度遠大于胚胎冷凍,復(fù)蘇率仍較低。學者們通過長期的實踐發(fā)現(xiàn),玻璃化冷凍技術(shù)相較于以往的冷凍技術(shù)能夠取得較為理想的卵子復(fù)蘇率,臨床上,可作為冷子的常規(guī)技術(shù)進行推廣。
是女性保護生育力一種方法,但不能承諾一定成功,必須強調(diào)該領(lǐng)域的很多方面還處于試驗階段。同時這一新的技術(shù)還伴發(fā)了很多倫理問題,涉及配子的收集以及將來配子的使用方面。所以,有關(guān)部門和醫(yī)學專家不建議單純借助冷子措施來人為地推遲生育年齡。
但是,生育力保存對于腫瘤患者更有意義。當今有效的腫瘤治療方法可以使癌癥患者的生存率大幅度地增加,尤其是對不同類型的白血病、乳腺癌患者來說,其存活率在70%以上。腫瘤發(fā)病率和患者生存率的增加使得癌癥患者的生育要求凸顯出來。
作為治療腫瘤的手段,手術(shù)、化療和放療引起的不良反應(yīng),可能或多或少會對卵巢功能及生育能力造成難以逆轉(zhuǎn)的損傷,包括卵巢功能下降,甚至是卵巢早衰,導(dǎo)致終身不孕不育。年輕的女性腫瘤康復(fù)患者雖然挽回了自己的生命,卻常常失去孕育自己下一代的機會,而且機體衰老加速,面臨著與絕經(jīng)后婦女同樣的健康挑戰(zhàn)。
為此,對年輕腫瘤患者來說,在實施化療和放療之前,進行有效和安全的生育力保存,是世界各國醫(yī)療健康事業(yè)的重要發(fā)展,在許多國家已經(jīng)作為腫瘤治療前的常規(guī)咨詢項目,然而,我國還未常規(guī)進行。
凍胚
胚胎冷凍技術(shù)是目前保存生育功能較為成熟的方法,其通過將胚胎和凍存液一同裝入冷凍管中,采用程序化冷凍或者玻璃化冷凍技術(shù)使胚胎處于冬眠狀態(tài),在零下196℃液氮環(huán)境中長期保存。
一般情況下,若在一個試管嬰兒周期中得到多個高質(zhì)量胚胎,移植1-2個胚胎后,可將剩余的胚胎凍存;而對于不宜在當次治療周期進行新鮮胚胎移植的患者,可將獲得的全部胚胎進行冷凍保存,待日后再行胚胎復(fù)蘇移植,即凍融胚胎移植。
胚胎冷凍的優(yōu)點
(1)可以保存體外受精移植后的剩余胚胎。
(2)減少多胞胎發(fā)生的風險。
(3)降低卵巢過度刺激綜合癥(OHSS)。
(4)等待植入前遺傳學診斷和篩查(PGD/PGS)的結(jié)果。
第三,≠凍胚。
雖然,也是在相同的條件下進行保存,但保存的是未經(jīng)過授精的卵子,而凍胚保存的卻是經(jīng)過授精培養(yǎng)后的胚胎,所以二者并不是完全相同的。
相比冷凍胚胎,冷子對技術(shù)有更高要求。卵子作為人體較大的細胞,含有大量的水分。不管是使用慢速冷凍還是采用超高速的玻璃化冷凍,冷凍前的脫水就顯得極其重要。
其次,卵子細胞膜對溫度變化的耐受能力和通透性都比較差,這些都會讓細胞保護劑滲入較困難。脫水不充分的話,在降溫過程中就易形成冰晶,損傷細胞膜和細胞器導(dǎo)致存活率降低。細胞保護劑同時又具有細胞毒性,高溫長時間接觸同樣可能導(dǎo)致細胞死亡。
所以,冷子的保護劑的成分、配比,解凍后受精的時機,對冷子的冷凍、復(fù)蘇、受精和之后的發(fā)育,都是很重要的,因此,對于實驗室技術(shù)與實驗人員的資歷有非常高的要求。目前,在世界范圍內(nèi),美國、英國、意大利等國的冷子技術(shù)已足夠成熟,能夠進入臨床應(yīng)用。